Var sasaldēt un atkausēt RIPA buferi 2-3 reizes, nezaudējot savu potenciālu, ja vien lietošanas laikā (20-30 min) to uzglabā uz ledus. Uzglabājiet buferšķīdumu sasaldētu -80 °C.
Cik ilgi es varu saglabāt RIPA buferi?
1. Ja buferis tiks lietots pastāvīgi, ieteicams 10x buferi turēt 4°C 1-2 nedēļas. Ilgāku laiku buferšķīdums jāuzglabā -20°C. Ja jāveic daudzi nelieli eksperimenti, ieteicams sadalīt 10x buferi.
Vai RIPA buferi var saglabāt?
Sagatavotais RIPA buferšķīdums jāsadala alikvotās daļās un jāuzglabā −20°C. Pirms tūlītējas lietošanas atkausētai daļai pievienojiet proteāzes un/vai fosfatāzes inhibitorus. Ar vienu mililitru buferšķīduma pietiek, lai lizētu aptuveni 5 miljonus šūnu. …
Kā jūs uzglabājat RIPA lizātus?
Izmantojiet sagatavotos lizātus pēc iespējas ātrāk un uzglabājiet pēc iespējas īsāku laiku. Uzglabājiet lizātus pie -80℃, cik ilgi vien iespējams. Lizātiem, kas būs jāuzglabā ilgstoši, pārvietojiet tikko sagatavotas mēģenes uz pieejamu -80 ℃ saldētavu, lai novērstu degradāciju.
Kā jūs atkausējat RIPA buferi?
Pēc galīgā mazgāšanas šķīduma noņemšanas no šūnām pievienojiet atbilstošu daudzumu RIPA buferšķīduma (1 ml uz 0,5 līdz 5 × 107 šūnām) un īsi samaisiet vai maisiet, lai šūnas pilnībā suspendētu. Inkubējiet uz ledus vai ledusskapī (2–8 °C) piecas minūtes.
