A viena zema g-spēka centrifugēšana solis nodrošina vieglu šūnu līzi un novērš plašu kodolu kontaktu ar citoplazmas vidi. Šī ātrā metode parāda augstu reproducējamību, jo pētniekam ir nepieciešamas salīdzinoši nelielas manipulācijas ar šūnām.
Ko centrifugēšana nodara šūnām?
Centrifugēšana dažādos ātrumos ļauj sadalīt daļiņas “frakcijās” atkarībā no tā, cik viegli tās nogulsnējas (1. lodziņš). Piemēram, ar zemu centrifugēšanas ātrumu lielas šūnas var atdalīt no mazām šūnām.
Vai centrifugēšana noņem atmirušās šūnas?
Mirušo un dzīvo šūnu atdalīšana ar centrifugēšanu
Viena no vienkāršākajām šūnu atlieku noņemšanas metodēm ir centrifugēšana ar blīvuma gradientu. Blīvuma gradienta centrifugēšana izmanto ierīci, ko sauc par centrifūgu, kas griež neviendabīgu maisījumu lielā ātrumā.
Kā jūs lizat šūnas?
Paņēmiens ietver šūnu suspensijas sasaldēšanu sausā ledus/etanola vannā vai saldētavā un pēc tam materiāla atkausēšanu istabas temperatūrā vai 37°C. Šī līzes metode izraisa šūnu uzbriest un galu galā saplīst, jo sasaldēšanas procesā veidojas ledus kristāli un pēc tam saraujas atkausēšanas laikā.
Kas notiek, ja šūnas centrifugējat pārāk ātri?
Pārāk ātra griešanās var izraisīt šūnu "izsmērēšanos" gar mēģenes sieniņu, kuras jums var pietrūkt, atkārtoti suspendējot šūnas.