Nitrocelulozes membrānas ir populāra matrica, ko izmanto proteīnu blotēšanai , jo tām ir augsta proteīnu saistīšanās afinitāte, saderība ar dažādām noteikšanas metodēm (ķīmiluminiscenci, hromogēno un fluorescenci), un spēja imobilizēt proteīnus, glikoproteīnus vai nukleīnskābes.
Kāpēc mēs izmantojam nitrocelulozi?
Nitrocelulozes priekšmetstiklis, nitrocelulozes membrāna vai nitrocelulozes papīrs ir lipīga membrāna, ko izmanto nukleīnskābju imobilizācijai Southern blot un Northern blots To izmanto arī proteīnu imobilizācijai rietumos. bloti un atomu spēka mikroskopija, lai noteiktu tās nespecifisko afinitāti pret aminoskābēm.
Kāpēc Western blotting izmanto PVDF?
Western blotēšana, izmantojot polivinilidēna difluorīda (PVDF) membrānas, ir viena no populārākajām proteīnu noteikšanas un raksturošanas metodēm. Ja šo paņēmienu apvieno ar imūndetekcijas noteikšanu, var noskaidrot konkrēta proteīna uzvedību.
Vai nitrocelulozes membrāna ir hidrofoba?
Atšķirībā no poliakrilamīda, nitroceluloze nodrošina piemērotu atbalstu turpmākai olb altumvielu krāsošanai vai imūnķīmiskai raksturošanai. Saistīšanās ar nitrocelulozi galvenokārt ir saistīta ar hidrofobu mijiedarbību (Schneider, 1980), lai gan var būt iesaistīti arī elektrostatiskie spēki (Farrah et al., 1981.
Kas ir labāks – nitroceluloze vai PVDF?
Kamēr nitroceluloze ir trausla un trausla, PVDF ir izturīgāka un tai ir augstāka ķīmiskā izturība, padarot to ideāli piemērotu atkārtotas zondēšanas un secības noteikšanai. Nitrocelulozi var būt grūti noņemt un atkārtoti pārbaudīt, nezaudējot signālu.
