Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) tests ir metode, ko izmanto, lai tieši vizualizētu proteīna-olb altumvielu mijiedarbību in vivo, izmantojot dzīvu šūnu attēlveidošanu vai fiksētas šūnas. … BiFC pirmo reizi aprakstīja Hu et al.
Kā darbojas bimolekulārā fluorescences komplementācija?
BiFC darbības princips ir balstīts uz fluorescējoša kompleksa izveidi divu fluorescējoša proteīna segmentu asociācijas rezultātā, kad tie atrodas tiešā tuvumā proteīna un proteīna mijiedarbības dēļ fragmentos, t.i., BiFC fluorofors ir sadalīts amino- un karboksilgala galos.
Kas ir BiFC tests?
bimolekulārās fluorescences komplementācijas (BiFC) tests nodrošina vienkāršu un tiešu olb altumvielu mijiedarbības vizualizāciju dzīvās šūnās (45). BiFC pieeja ir balstīta uz fluorescējoša kompleksa veidošanos, kad divi proteīni, kas sapludināti ar fluorescējoša proteīna nefluorescējošiem fragmentiem, mijiedarbojas savā starpā ().
Kāpēc tiek veikts BiFC tests?
BiFC ideja ir paust GFP puses, kas sapludinātas ar jūsu interesējošajiem proteīniem Ja POI mijiedarbojas, varat apvienot abas puses, lai iegūtu funkcionālu GFP. Tātad, ja šūnā ir izteikta puse no GFP, es neesmu pārsteigts, ka GFP antiviela var to noteikt.
Vai BiFC ir atgriezenisks?
BiFC kompleksu neatgriezeniskums ir labi dokumentēts (10), un šķiet, ka lielākā daļa, ja ne visas, fluorescējošās olb altumvielas balstītas BiFC sistēmas ir neatgriezeniskas (8, 33, 43, 48–51).
